當前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > > 人ELISA試劑盒 > cAMP環(huán)磷酸腺苷(cAMP) ELISA 試劑盒
簡要描述:環(huán)磷酸腺苷(cAMP) ELISA 試劑盒 Cyclic adenosine monophosphate Assay Kit!本公司長期經(jīng)營代理試劑盒,價格實惠,質(zhì)量保證,價格請咨詢在線人員。
產(chǎn)品分類
相關(guān)文章
Related Articles詳細介紹
品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
---|
詳細請咨詢銷售人員:
環(huán)磷酸腺苷(cAMP) ELISA 試劑盒
工作原理
本試劑盒采用雙位點夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),測定樣品中的水平。向預(yù)先包被抗體的酶標孔中加入標準品、待測樣本和HRP標記的抗體,經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的組分,然后再加入底物A、B,產(chǎn)生藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺與樣品中的濃度呈正相關(guān)。
環(huán)磷酸腺苷(cAMP) ELISA 試劑盒
1 | 標準品(100pg/ml) | 0.5ml | 7 | 顯色劑A液 | 6ml |
2 | 標準品稀釋液 | 6mL | 8 | 顯色劑B液 | 6ml |
3 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 9 | 終止液 | 6ml |
4 | 酶標試劑 | 6ml | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 20×濃縮洗滌液 | 25ml | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 樣品稀釋液 | 6ml | 12 | 密封袋 | 1個 |
注:標準品用標準品稀釋液依次稀釋為:100、50、25、12.5、6.25、0 pg/ml
需要而未提供的試劑和器材
1. 37℃恒溫箱。
2. 標準規(guī)格酶標儀。
3. 精密移液器及一次性吸頭
4. 蒸餾水,
5. 一次性試管
6. 吸水紙
注意事項
1. 從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差
3. 建議所有標準品、樣本都做雙份檢測。
4. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
5. 為避免交叉污染,要避免重復使用手中的吸頭和封板膜。
6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7. 底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
洗板方法
手工洗板方法:甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次。
自動洗板:如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中
標本要求
1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融
操作程序
1. 分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準品孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品孔中加入標準品50μl;在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。輕輕晃動混勻,37℃溫育60分鐘。
2. 棄去液體,甩干,每孔加滿稀釋后洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。如此重復5次,拍干。
3. 每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
4. 取出酶標板,每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
5. 測定:以空白孔調(diào)零,在450nm波長下測量各孔的吸光度值(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
6. 根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了的,其實際濃度應(yīng)該乘以總稀釋倍數(shù)。
產(chǎn)品咨詢
聯(lián)系我們
上海賽默生物科技發(fā)展有限公司 公司地址:上海市閔行區(qū)鶴慶路398號41幢2層L2048室 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)掃一掃 更多精彩
微信二維碼
網(wǎng)站二維碼